点灌流细胞培养胎牛血清使用中常见的四大问题


  盘点灌流细胞培养胎牛血清使用中常见的四大问题
  1、如何储存和解冻Gibco胎牛血清才不会使产品质量受损?
  将血清从冷冻箱取出后,先置于2~8℃冰箱使之融解,然后在室温下使之全融。但必须注意的是,融解过程中必须规则地摇晃均匀。
  长时间储存在2-8℃时,血清中的各种蛋白和脂蛋白(如冷凝集素、纤维蛋白原、玻粘连蛋白等)可能聚集而形成沉淀或可见的混浊。因此,推荐在-20℃以下储存血清,并避免反复冻融。
  我们建议血清应保存在-2O℃。若存放于4℃时,请勿超过一个月。若一次无法用完一瓶,建议无菌分装血清至恰当的灭菌容器内,再放回冷冻。
  2、血清中包含絮状沉淀,它们是什么,怎么处理?
  沉淀包含纤维蛋白和脂蛋白。这是正常特性,不会影响产品性质。要除去沉淀,离心血清(400g,1-2分钟)或者简单的让其沉淀在瓶子底部,将血清小心的转移到另一个无菌瓶里(一般不建议采用过滤的方法除去沉淀,因为沉淀会堵塞滤膜而无法过滤)。大多情况轻轻摇动沉淀并加热至37℃就会再溶解。所以,使用产品时要摇动并加热血清至37℃,沉淀会自然消失。
  3、如何避免Gibco胎牛血清中产生沉淀?
  按如下操作可避免沉淀的产生:
  (1)解冻血清时,请随时将之摇晃均匀,使温度及成分均一,减少沉淀的发生。
  (2)血清分装冻存时,须规则摇晃均匀(小心勿造成气泡),使温度与成分均一。
  (3)勿直接由-20℃直接至37℃解冻,因温度改变太大,容易造成蛋白质凝结而发生沉淀。
  (4)勿将血清置于37℃太久,否则血清会变得浑浊,同时血清中许多较不稳定的成份也会因此受到破坏,从而影响血清的品质。
  (5)血清的热灭活非常容易造成沉淀物的增多,若非必要,可以无须做此步骤。
  (6)若必须做血清的热灭活,请遵守56℃,30分钟的原则,并且随时摇晃均匀。温度过高,时间过久或摇晃不均匀,都会造成沉淀物的增多。
  4、培养基中添加了Gibco胎牛血清和抗生素后,可长期保存吗?
  一旦您在新鲜培养基中添加了血清和抗生素时,您应该在两到三周内使用它。因为一些抗生素和血清中的基本成分在解冻后就开始降解。


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